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EnglishRÉSUMÉ
L'électrophorèse capillaire est une technique séparative, souvent commercialisée sous forme d'instruments où l'ensemble des étapes, incluant injection des échantillons, séparation et détection, généralement optique, sont totalement intégrées. L'attrait suscité par sa version miniaturisée plus récente est notamment dû à la perspective d'analyses très rapides et de développements de laboratoires sur puce. Ce changement d'échelle n'est cependant pas sans conséquence, notamment sur les étapes d'injection et de détection, qui font appel à d'autres technologies.
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Agnès HAGÈGE : Chargée de recherche CNRS à l'Institut de Biologie Environnementale et de Biotechnologie, UMR 7265 CNRS-CEA-Aix-Marseille II et SBTN, CEA Marcoule
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Thi Ngoc Suong HUYNH : Diplômée de la faculté de pharmacie de Hô Chi Minh-ville (Vietnam) Doctorante au Service de Biochimie et de Toxicologie Nucléaire, CEA Marcoule - Cet article est la réédition actualisée de l'article [P 3 366] paru en 2003 rédigé par Myriam TAVERNA, Isabelle LE POTIER et Philippe MORIN.
INTRODUCTION
L'électrophorèse capillaire est une technique séparative basée sur la migration d'espèces chargées dans un champ électrique, en fonction de leur mobilité électrophorétique.
Elle ne nécessite que de très petites quantités d'échantillon et offre comme avantage une grande efficacité de séparation mais également un faible coût de fonctionnement associé à un faible volume de déchets générés.
Elle est aujourd'hui reconnue comme une technique séparative à part entière et intégrée à de nombreuses plateformes d'analyse dans les domaines pharmaceutique, biomédical, environnemental… et est applicable à la séparation de composés très variés, allant des petits ions inorganiques aux macromolécules biologiques (sucres, protéines, ADN…).
Une part importante de son implantation est due à son appareillage relativement simple, ne présentant que peu de parties mobiles, la rendant de ce fait adaptée à une miniaturisation. Grâce à ces caractéristiques, son intégration au sein de laboratoires sur puce a suscité un engouement considérable dans le domaine de l'analyse.
Par ailleurs, les développements instrumentaux sans cesse réalisés ont permis d'accroître ses performances et ses possibilités. À ce titre, le couplage avec la spectrométrie de masse peut être considéré comme une avancée déterminante dans l'expansion de cette technique.
Le but de cet article est de donner un aperçu global de l'appareillage utilisé en électrophorèse capillaire et d'en détailler les principaux composants et de mentionner les configurations les plus utilisées et les nombreuses évolutions, notamment dans le domaine de la détection. Une part importante est consacrée à la miniaturisation de cette technique.
Cet article fait partie d'une série dédiée à l'électrophorèse capillaire :
VERSIONS
- Version archivée 1 de déc. 2003 par Myriam TAVERNA, Isabelle LE POTIER, Philippe MORIN
DOI (Digital Object Identifier)
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5. Conclusion
L'électrophorèse capillaire s'est aujourd'hui imposée dans le panel des techniques séparatives. La possibilité d'utiliser des détecteurs variés augmente encore sa flexibilité et sa capacité à s'adresser à des domaines très différents.
L'électrophorèse capillaire a, sans conteste, un rôle clé à jouer dans le développement des laboratoires sur puce, systèmes intégrés regroupant la totalité de la chaîne d'analyse.
La force motrice de ces développements est la demande de nombreux secteurs d'applications de disposer d'appareils portables ou de capteurs pour réaliser des analyses directement sur site.
Parmi ses points forts, on peut citer le flux électro-osmotique servant à véhiculer les fluides et permettant de s'affranchir de pompes mais aussi la possibilité d'utiliser les capillaires comme de véritables microréacteurs (ainsi qu'en témoignent les développements réalisés dans les domaines de la préconcentration ou de la dérivation). Il faut également noter que le format puce offre des possibilités de multiplexage (analyses en parallèle), permettant ainsi la réalisation de nombreuses analyses en un temps réduit.
Cependant, de nombreux verrous sont encore à lever pour obtenir de vrais laboratoires sur puce. Ainsi, bien que l'utilisation de faibles volumes d'échantillon soit un avantage pour de nombreuses raisons, elle engendre également des inconvénients, notamment quant à la sensibilité de détection requise, encore peu compatible avec la miniaturisation. Le développement de détecteurs optiques est cependant un secteur très actif.
Par ailleurs, l'intégration d'étapes de traitement d'échantillon nécessite la miniaturisation de composants clés tels que vannes, pompes…
Enfin, le développement de systèmes intégrés jetables pourrait également constituer un atout important.
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BIBLIOGRAPHIE
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(1) - TAVERNA (M.), LE POTIER (I.), MORIN (Ph.) - Électrophorèse capillaire : Appareillage. - Techniques de l'Ingénieur [P 3 366] (2003).
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(2) - HJERTEN (S.) - Free zone electrophoresis. - Électrophorèse de zone. Chromatographic reviews, 9, p. 122-219 (1967).
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(3) - JORGENSON (J.W), LUKACS (K.D.) - Zone Electrophoresis in Open-Tubular Glass Capillaries. - – Électrophorèse de zone dans des capillaires ouverts en verre. Analytical chemistry, 53, p. 1298-1302 (1981).
-
(4) - BREADMORE (M.C.) - Capillary and microchip electrophoresis : Challenging the most common conceptions. - Électrophorèse capillaire et sur micro-puce : Remise en cause des idées les plus répandues. Journal of chromatography A, 1221, p. 42-55 (2012).
-
(5) - CIFUENTES (A.), CANALEJAS (P.), DIEZ-MASA (J.C.) - Preparation of linear polyacrylamide-coated capillaries : Study of the polymerization process and its effect on capillary electrophoresis performance. - Préparation de capillaires greffés par du polyacrylamide...
DANS NOS BASES DOCUMENTAIRES
1.1 Constructeurs – Fournisseurs – Distributeurs (liste non exhaustive)
Agilent Technologies (appareillage conventionnel) http://www.chem.agilent.com
Applied Biosystems (appareillage conventionnel) http://www.appliedbiosystems.com
Beckman Coulter (appareillage conventionnel) http://www.beckmancoulter.com
Perkin Elmer (appareillage conventionnel) http://www.perkinelmer.com
CE Resources (appareillage portable) http://www.ce-resources.com
Micralyne (puces) http://www.micralyne.com
Microfluidic Chipshop (puces) http://www.microfluidic-chipshop.com
Micronit Microfluidics (puces) http://www.micronit.com
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