Bibliographie & annexes
Présentation
En anglais
RÉSUMÉ
La chromatographie planaire se distingue nettement de la chromatographie classique, et plusieurs types de détection sont possibles : en discontinu, en continu. Les méthodes d'analyse qui en découlent sont soit qualitatives (détection visuelle) soit quantitatives (densitométrie). Dans cette dernière configuration, la plaque chromatographique peut être alors considérée comme une colonne plate à usage unique. Après grattage de la zone où la substance a été localisée, la phase stationnaire est séparée du soluté et soumis à une technique de spectrométrie (infrarouge, de masse...).
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Planar chromatography is very different from traditional chromatography and several types of detection are possible: discontinuous and continuous. The analysis methods are either quantitative (visual detection) or quantitative (densitometry). In the second case, the chromatographic plate can be considered as a flat column for a single use. After scraping the area where the substance has been localized, the stationary phase is separated from the solute and subjected to a spectrometric technique (infrared, mass, etc.).
Auteur(s)
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Antoine Michel SIOUFFI : Docteur ès sciences - Professeur émérite à l’Université Paul Cézanne, Aix Marseille III
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Chantal DAUPHIN : Docteur ès sciences pharmaceutiques - Maître de conférences à l’université Paris XI
-
Dominique PRADEAU : Docteur ès sciences pharmaceutiques - Pharmacien responsable de l’Établissement pharmaceutique des Hôpitaux de Paris
INTRODUCTION
En chromatographie planaire classique, la détection des substances est une opération distincte de la chromatographie et elle s’effectue sur une couche débarrassée du solvant de développement : c’est une détection en discontinu. En chromatographie planaire à flux forcé, on peut procéder de la même façon, mais il est également possible de réaliser une détection en continu au moyen d’un détecteur semblable à ceux utilisés en CLHP. En détection en discontinu, la méthode générale consiste à comparer les régions de la couche où il n’y a pas d’échantillon aux régions dans lesquelles l’échantillon est présent. Lorsque suffisamment de substance peut être récupérée pour procéder à une identification par une méthode spectrale, la plaque est grattée à l’endroit où la substance a été localisée, la phase stationnaire est séparée du soluté et il ne reste plus qu’à réaliser la spectrométrie (infrarouge, de masse, etc.). Nous allons comparer qualitativement et quantitativement les différentes méthodes d’analyse.
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Formation de dérivés pré- ou postchromatographie
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2. Analyse quantitative par densitométrie
2.1 Considérations théoriques
La liste des notations et des abréviations est dans le Chromatographie planaire. Partie 1.
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Quand une lumière monochromatique arrive sur un milieu opaque, une partie est réfléchie de façon spéculaire (comme par un miroir), une partie est absorbée par le milieu et dissipée sous forme de chaleur et le reste est réfléchi et transmis de façon diffuse par le milieu. C’est cette dernière partie qui intéresse le chromatographiste. La propagation de la lumière à l’intérieur d’un milieu opaque granulaire est un processus très complexe qui ne peut être formulé par des équations ayant une solution analytique. Des simplifications sont nécessaires et le modèle généralement accepté est celui décrit par Kubelka et Munk [1]. Soit e l’épaisseur de la couche et dx une portion infinitésimale dans laquelle la lumière se propage. Les flux de lumière dans la couche dx correspondent à la lumière transmise It et à la lumière réfléchie Ir. L’intensité de la lumière transmise décroît du fait de l’absorption et de la dispersion, et elle s’accroît du fait de la dispersion de la lumière cheminant en sens opposé. On peut alors écrire :
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avec :
-
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: - coefficient de diffraction par unité d’épaisseur
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BIBLIOGRAPHIE
-
(1) - STAHL (E.) - Dünnschicht-Chromatographie. Ein Laboratoriumshandbuch - . Springer-Verlag, Berlin (1962).
-
(2) - RANDERATH (K.) - Chromatographie sur couches minces - . Gauthier-Villars, Paris (1971).
-
(3) - GUIOCHON (G.), GONNORD (M.F.), ZAKARIA (M.), BEAVER (L.), SIOUFFI (A.M.) - Chromatography with a two dimensional column - . Chromatographia, 17, 121-126 (1983).
-
(4) - RIGHEZZA (M.), SIOUFFI (A.M.) - Planar chromatography with rectangular packed capillary columns and electrochemical detection - . J. Planar Chromatogr., 1, 293-298 (1988).
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(5) - RUOFF (A.L.), GIDDINGS (J.C.), STEWART (G.H.), SHIN (H.K.) - Diffusion of liquids in unsatured paper - . J. Planar Chromatogr., 3, 438-445 (1960).
-
(6) - GUIOCHON (G.), SIOUFFI (A.M.) - Study of the performances of thin layer chromatography. III. Flow velocity of the mobile phase - ....
(liste non exhaustive)
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Merck http://www.merck.com
Macherey Nagel http://www.macherey-nagel.com
Whatman http://www.whatman.com
Analtech http://www.analtech.com
HAUT DE PAGE1.2 Appareillages de chromatographie planaire
Camag http://www.camag.ch
Desaga http://www.desaga.de
Radiomatic http://las.perkinelmer.com
Shimadzu http://www.shimadzu.fr
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