Présentation
RÉSUMÉ
L’imagerie par tomographie à cohérence optique (OCT) est une technique de microscopie optique sans marquage permettant de reconstruire l’architecture 3D d’un échantillon grâce aux propriétés des interférences lumineuses. L’OCT est utilisé comme un outil de diagnostic de référence en ophtalmologie, notamment car elle permet d’imager la rétine sur de larges champs de vue, tout en conservant une bonne résolution axiale.
L’utilisation de l’OCT s’étend progressivement dans de nombreux domaines, tels la biophotonique ou la métrologie. Cet article présente dans un premier temps le principe de l’OCT et compare ses différentes configurations. L’article détaille enfin la configuration la plus usuelle, l’OCT en domaine de Fourier, et deux applications à l’imagerie rétinienne in vivo et l’imagerie de biofilms bactériens.
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Olivier THOUVENIN : Maître de conférences à l’institut Langevin, ESPCI Paris — PSL
INTRODUCTION
La microscopie optique permet de caractériser des échantillons, industriels ou biologiques, à une résolution de l’ordre du micromètre sur des échelles de l’ordre du mm3. À l’inverse de l’imagerie de fluorescence, technique de microscopie la plus populaire en biologie notamment, l’imagerie sans marquage utilise les propriétés intrinsèques des matériaux et autres tissus biologiques pour en caractériser la structure et éventuellement la fonction. Les propriétés d’absorption de la lumière, de diffusion, c’est-à-dire la capacité d’un objet à changer la direction d’une lumière incidente, ou encore de déphasage, soit la capacité à retarder une lumière incidente, peuvent être utilisées et combinées pour caractériser finement un échantillon.
De manière générale en imagerie, il est souvent souhaitable de maximiser le volume d’observation de l’échantillon, tout en conservant une résolution la plus fine possible. Néanmoins, la résolution axiale, dans la direction de propagation de l’onde, décroît très vite avec l’ouverture numérique, de telle sorte qu’il est difficile d’imager de grands champs de vue tout en conservant une résolution axiale suffisante. En imagerie ultrasonore, ce problème est réglé en mesurant le temps de propagation que l’onde acoustique met pour faire un aller-retour de la source au détecteur, afin de retrouver la profondeur d’une structure donnée.
La tomographie à cohérence optique, ou OCT (Optical coherence tomography) en anglais, peut être décrite comme l’équivalent optique de l’imagerie ultrasonore. Elle permet d’imager les structures qui rétrodiffusent la lumière- essentiellement ici dû à un contraste d’indice optique- et de mesurer la profondeur de ces structures via la mesure du temps de propagation des photons dans l’échantillon. Malheureusement, ce n’est pas aussi simple en optique à cause de la trop grande vitesse de la lumière, et il est nécessaire d’utiliser une mesure indirecte grâce aux propriétés d’interférences optiques à faible cohérence. Il devient alors possible de mesurer des différences de temps de propagation entre les photons diffusés par l’échantillon et ceux réfléchis par un miroir de référence dont la position axiale est contrôlée. Ainsi, la résolution axiale en OCT ne dépend que des propriétés de cohérence de la lumière et non plus des paramètres d’imagerie. Cela permet éventuellement de maximiser les volumes d’échantillon imagés.
Cet article a pour objectif la description de la technique d’OCT, et de comparer les différentes configurations existantes. Afin de bien comprendre les enjeux et principes sous-jacents à cette technique, des principes généraux de microscopie et d’interférométrie sont présentés dans un premier temps.
Les diverses configurations possibles en OCT sont détaillées dans l’article avant de se focaliser sur la configuration la plus utilisée, dite d’OCT en domaine de Fourier. L’article détaille la formation et les caractéristiques des images obtenues, ainsi que des applications en imagerie de la rétine et de biofilms bactériens.
MOTS-CLÉS
Métrologie imagerie contrôle non destructif tomographie microscopie optique interférométrie ophtalmologie biophotonique
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1. Principes généraux
Au cours de cette partie, nous allons dresser la fiche d’identité de la technique de tomographie à cohérence optique (OCT), en précisant ce qu’elle est, ce qu’on peut mesurer avec, et à quoi cette technique sert-elle, sans pour autant rentrer dans les détails techniques d’implémentation, qui seront abordés dans la suite de l’article.
Dans un premier temps, nous préciserons comment il est possible de mesurer un temps de propagation de la lumière pour quantifier la profondeur des structures qui composent un échantillon. Ensuite, nous nous intéresserons aux différentes théories qui prédisent la quantité de lumière renvoyée par les différentes structures visibles en OCT en fonction des régimes de taille de ces structures. Enfin, nous expliquerons les principes d’imagerie qui permettent de comprendre pourquoi et dans quel cas l’OCT est une technique d’imagerie d’intérêt.
1.1 Principe de la tomographie à cohérence optique
Comme introduit plus haut, la tomographie à cohérence optique (OCT) est souvent décrite comme l’équivalent optique de l’imagerie ultrasonore. Prenons le cas d’une source laser collimatée (onde plane) qui illumine un échantillon d’intérêt. Les différentes structures de l’échantillon peuvent renvoyer vers l’arrière (voir section suivante) une partie du flux lumineux vers un détecteur potentiel. Le problème est que, par définition, ce faisceau a une profondeur de champ très grande, et il n’est alors pas possible de distinguer la profondeur des différentes structures, autrement dit à quelle profondeur la lumière a été renvoyée vers l’arrière.
En échographie, dans un cas très similaire, il est alors possible d’utiliser le temps de propagation de l’onde pour déterminer la position axiale des différentes structures de l’échantillon. Malheureusement, en optique, une telle mesure est compliquée du fait de la grande vitesse de la lumière. Deux échos optiques provenant de structures séparées axialement de 10 µm ne sont séparés temporellement que de seulement 30 femtosecondes, intervalle temporel trop fin pour être mesuré directement.
La tomographie à cohérence optique (OCT) est une technique d’imagerie qui vient alors utiliser une mesure indirecte du temps de propagation via une détection interférométrique...
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BIBLIOGRAPHIE
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(1) - CARMINATI (R.) - Ondes en milieux complexes. - ESPCI Paris (2016). PDF disponible en ligne https://www.institut-langevin.espci.fr/IMG/pdf/ondes_milieux_complexes_carminati_2016.pdf
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