Présentation
Auteur(s)
-
Pierre GAREIL : Professeur à l’École Nationale Supérieure de Chimie de Paris
-
Gabriel PELTRE : Président fondateur de la Société Française d’ÉlectrophorèseInstitut Pasteur
Lire cet article issu d'une ressource documentaire complète, actualisée et validée par des comités scientifiques.
Lire l’articleINTRODUCTION
L‘électrophorèse est une technique importante dans la purification de très nombreuses molécules chargées électriquement. Elle est devenue un outil principalement analytique, indispensable à la détermination de propriétés de molécules aussi essentielles que leur point isoélectrique, leur mobilité électrophorétique, leur taille. Elle permet aussi d’aborder leur solubilité, leur affinité pour des ligands (lectines, anticorps... ). Pour remplir cette tâche, l’électrophorèse est devenue « protéiforme », c’est-à-dire extrêmement variée et spécialisée ; une évolution de son champ d’application est apparue : les petits ions, les peptides, les protéines, puis les acides nucléiques.
À partir de 1976, les acides nucléiques et les nucléotides ont été analysés avec une extraordinaire finesse par électrophorèse permettant de connaître la séquence des ADN (acide désoxyribonucléique ), nucléotide par nucléotide. C’est ainsi qu’il est devenu plus facile de déduire la séquence des acides aminés de certaines protéines que d’analyser l’enchaînement de ces acides aminés, présents dans la protéine hautement purifiée, par dégradations chimique et enzymatique.
L’électrophorèse capillaire introduite en 1965 ne verra son véritable développement qu’au cours des années 80 par la commercialisation d’appareils performants permettant des séparations rapides et à haute sensibilité de détection dans des capillaires de moins de 100 µm de diamètre intérieur.
Enfin l’électrophorèse peut aussi exceller dans le domaine préparatif, là où la chromatographie, l’ultrafiltration, la centrifugation sont bien présentes soit par des techniques en continu (veine liquide ), soit par recyclage pour obtenir de très hautes puretés (électrolyseur à multicompartiments ).
VERSIONS
- Version archivée 1 de janv. 1980 par Jean MAHENC, Victor SANCHEZ
DOI (Digital Object Identifier)
Cet article fait partie de l’offre
Techniques d'analyse
(289 articles en ce moment)
Cette offre vous donne accès à :
Une base complète d’articles
Actualisée et enrichie d’articles validés par nos comités scientifiques
Des services
Un ensemble d'outils exclusifs en complément des ressources
Un Parcours Pratique
Opérationnel et didactique, pour garantir l'acquisition des compétences transverses
Doc & Quiz
Des articles interactifs avec des quiz, pour une lecture constructive
Présentation
2. Mise en œuvre et applications
2.1 Électrophorèse de zone
Comme nous venons de le voir 1.1.1 l’électrophorèse de zone est dans son principe la plus simple des électrophorèses. La séparation des échantillons s’effectue dans un seul tampon de l’anode à la cathode. Sa mise en œuvre est également très simple. Deux applications seulement seront envisagées : en gel mince et en capillaire.
HAUT DE PAGE
Elle est constituée d’une cuve où est placé le gel support de la séparation et d’un générateur de courant électrique. Les cuves commerciales disponibles sont de deux types principalement, à gel vertical ou horizontal.
-
Le gel vertical est en général non thermostaté dans les appareils les plus simples (figure 3). Il est en sandwich entre deux plaques de verre. Son extrémité inférieure est le plus souvent en liaison plus ou moins directe avec le réservoir d’anode alors que son extrémité supérieure est en contact avec la cathode. Une faiblesse de ce dispositif est la possibilité de fuites du liquide supérieur à la cathode, surtout pour des appareils de grandes dimensions. Certains de ces appareils sont conçus pour permettre l’électrophorèse de plusieurs gels verticaux parallèles et identiques dans des mêmes conditions de séparations. Dans ce cas, une régulation thermique est souvent nécessaire.
-
Parmi les appareils à gel horizontal, on distingue les appareils les plus simples habituellement utilisés pour séparer les acides nucléiques. On les appelle encore « à...
Cet article fait partie de l’offre
Techniques d'analyse
(289 articles en ce moment)
Cette offre vous donne accès à :
Une base complète d’articles
Actualisée et enrichie d’articles validés par nos comités scientifiques
Des services
Un ensemble d'outils exclusifs en complément des ressources
Un Parcours Pratique
Opérationnel et didactique, pour garantir l'acquisition des compétences transverses
Doc & Quiz
Des articles interactifs avec des quiz, pour une lecture constructive
Mise en œuvre et applications
BIBLIOGRAPHIE
-
(1) - DEYL (Z.) - Electrophoresis : a survey of techniques and applications. Part A : techniques. - J. Chromatogr. Lib., vol. 18, Elsevier, Amsterdam, 1979.
-
(2) - GROSSMAN (P.D.), COLBURN (J.C.) - Capillary electrophoresis : theory and practice. - Academic Press, San Diego, 1992.
-
(3) - LI (S.F.Y.) - Capillary electrophoresis : principles, practice and applications. - J. Chromatogr. Lib., vol. 52, Elsevier, Amsterdam, 1992.
-
(4) - HEIGER (D.N.) - High performance capillary electrophoresis : an introduction. - Hewlett-Packard, Walbronn, 1992.
-
(5) - JANDICK (P.), BONN (G.) - Capillary electrophoresis of small molecules and ions. - VCH, Weinheim, 1993.
-
(6) - GAREIL (P.) - L’électrophorèse de zone et la chromatographie électrocinétique capillaires : I. Principes et notions fondamentales. - ...
ANNEXES
BAALBAKI (B.) - Apport de l’électrophorèse capillaire au contrôle de qualité de spécialités pharmaceutiques. - 2003. Université Montpellier 1.
DJOUADI (Z.) - Séquençage de l’ADN par électrophorèse : étude des effets thermiques sur la migration. - 2000. Université d’Orsay.
DUTEIL (S.) - Séparation et caractérisation des fragments d’héparine par électrophorèse capillaire et spectrométrie de masse. - 2000. Université Paris 6.
MARTIN JOUET (M.) - Évaluation des possibilités d’utilisation de l’électrophorèse capillaire pour les études de complexation. - 2000. Université de Strasbourg.
VAYABOURY (W.) - Polymérisation du N-carboxyanhydride de la N[epsilon]-trifluoroacétyl-L-lysine : étude mécanistique et caractérisation par électrophorèse capillaire. - 2003. Université Montpellier 2.
BEAUNOM (J.) - L’électrophorèse capillaire : une technique d’avenir ; application au dosage de l’amikacine (des pharmacies industrielle et biomédicale). - 2000. Université de Reims.
JOUBERT (R.) - Application de l’électrophorèse bidimensionnelle des protéines à l’étude des levures industrielles de brasserie. - 2000. Université Bordeaux 2.
AIT-ADOUBEL (A.) - Nouvelles approches en électrophorèse capillaire pour l’énantioséparation d’acides aminés aromatiques ou aliphatiques non dérivés. - 2004. Université de Rouen.
DESCROIX (S.) - L’électrophorèse capillaire en milieu non aqueux : contribution à la compréhension des phénomènes physico-chimiques impliqués et applications. - 2002. Université Paris 6.
BENNANI...
Cet article fait partie de l’offre
Techniques d'analyse
(289 articles en ce moment)
Cette offre vous donne accès à :
Une base complète d’articles
Actualisée et enrichie d’articles validés par nos comités scientifiques
Des services
Un ensemble d'outils exclusifs en complément des ressources
Un Parcours Pratique
Opérationnel et didactique, pour garantir l'acquisition des compétences transverses
Doc & Quiz
Des articles interactifs avec des quiz, pour une lecture constructive