Présentation
Auteur(s)
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Pierre GAREIL : Professeur à l’École Nationale Supérieure de Chimie de Paris
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Gabriel PELTRE : Président fondateur de la Société Française d’ÉlectrophorèseInstitut Pasteur
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Lire l’articleINTRODUCTION
L‘électrophorèse est une technique importante dans la purification de très nombreuses molécules chargées électriquement. Elle est devenue un outil principalement analytique, indispensable à la détermination de propriétés de molécules aussi essentielles que leur point isoélectrique, leur mobilité électrophorétique, leur taille. Elle permet aussi d’aborder leur solubilité, leur affinité pour des ligands (lectines, anticorps... ). Pour remplir cette tâche, l’électrophorèse est devenue « protéiforme », c’est-à-dire extrêmement variée et spécialisée ; une évolution de son champ d’application est apparue : les petits ions, les peptides, les protéines, puis les acides nucléiques.
À partir de 1976, les acides nucléiques et les nucléotides ont été analysés avec une extraordinaire finesse par électrophorèse permettant de connaître la séquence des ADN (acide désoxyribonucléique ), nucléotide par nucléotide. C’est ainsi qu’il est devenu plus facile de déduire la séquence des acides aminés de certaines protéines que d’analyser l’enchaînement de ces acides aminés, présents dans la protéine hautement purifiée, par dégradations chimique et enzymatique.
L’électrophorèse capillaire introduite en 1965 ne verra son véritable développement qu’au cours des années 80 par la commercialisation d’appareils performants permettant des séparations rapides et à haute sensibilité de détection dans des capillaires de moins de 100 µm de diamètre intérieur.
Enfin l’électrophorèse peut aussi exceller dans le domaine préparatif, là où la chromatographie, l’ultrafiltration, la centrifugation sont bien présentes soit par des techniques en continu (veine liquide ), soit par recyclage pour obtenir de très hautes puretés (électrolyseur à multicompartiments ).
VERSIONS
- Version archivée 1 de janv. 1980 par Jean MAHENC, Victor SANCHEZ
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3. Conclusion
L’électrophorèse en gel mince continue d’occuper la place de choix dans les laboratoires d’analyses et de recherches biologiques et biochimiques. Appliquée d’abord à la séparation des peptides et des protéines, elle a, à partir de 1976, permis l’analyse des acides nucléiques, étape indispensable au grand essor de la génétique moléculaire. La dernière décennie a connu l’apparition et la mise en œuvre en capillaire et en milieu libre de l’électrophorèse, plus instrumentale et souvent entièrement automatisée. Le champ d’application de la méthode s’est alors ouvert aux petits ions, minéraux et organiques et même aux molécules neutres polaires ou apolaires. Les chimistes et notamment des chromatographistes praticiens ont trouvé un nouvel intérêt pour ces techniques. Les principes séparatifs de l’électrophorèse et de la chromatographie sont en effet très complémentaires, en particulier pour la détermination des puretés. L’électrophorèse capillaire présente en outre des atouts spécifiques, liés à la simplicité de sa mise en œuvre, à sa miniaturisation et à l’absence de phase stationnaire solide. L’électrophorèse capillaire est sans doute appelée à devenir une technique majeure, en relation avec le développement des sciences du vivant et de l’interface entre la biologie et la chimie. Parallèlement, l’électrophorèse en gel mince a bénéficié également de progrès substantiels sur le plan de la nature des gels, de la détection, de la lecture, de l’exploitation des résultats et de l’automatisation globale des techniques. Elle constitue encore une approche sans équivalent par ses performances, son coût relativement faible et sa remarquable adaptation à de multiples applications, en continuelle évolution, au service de la recherche ou de l’analyse de routine.
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BIBLIOGRAPHIE
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(1) - DEYL (Z.) - Electrophoresis : a survey of techniques and applications. Part A : techniques. - J. Chromatogr. Lib., vol. 18, Elsevier, Amsterdam, 1979.
-
(2) - GROSSMAN (P.D.), COLBURN (J.C.) - Capillary electrophoresis : theory and practice. - Academic Press, San Diego, 1992.
-
(3) - LI (S.F.Y.) - Capillary electrophoresis : principles, practice and applications. - J. Chromatogr. Lib., vol. 52, Elsevier, Amsterdam, 1992.
-
(4) - HEIGER (D.N.) - High performance capillary electrophoresis : an introduction. - Hewlett-Packard, Walbronn, 1992.
-
(5) - JANDICK (P.), BONN (G.) - Capillary electrophoresis of small molecules and ions. - VCH, Weinheim, 1993.
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(6) - GAREIL (P.) - L’électrophorèse de zone et la chromatographie électrocinétique capillaires : I. Principes et notions fondamentales. - ...
ANNEXES
BAALBAKI (B.) - Apport de l’électrophorèse capillaire au contrôle de qualité de spécialités pharmaceutiques. - 2003. Université Montpellier 1.
DJOUADI (Z.) - Séquençage de l’ADN par électrophorèse : étude des effets thermiques sur la migration. - 2000. Université d’Orsay.
DUTEIL (S.) - Séparation et caractérisation des fragments d’héparine par électrophorèse capillaire et spectrométrie de masse. - 2000. Université Paris 6.
MARTIN JOUET (M.) - Évaluation des possibilités d’utilisation de l’électrophorèse capillaire pour les études de complexation. - 2000. Université de Strasbourg.
VAYABOURY (W.) - Polymérisation du N-carboxyanhydride de la N[epsilon]-trifluoroacétyl-L-lysine : étude mécanistique et caractérisation par électrophorèse capillaire. - 2003. Université Montpellier 2.
BEAUNOM (J.) - L’électrophorèse capillaire : une technique d’avenir ; application au dosage de l’amikacine (des pharmacies industrielle et biomédicale). - 2000. Université de Reims.
JOUBERT (R.) - Application de l’électrophorèse bidimensionnelle des protéines à l’étude des levures industrielles de brasserie. - 2000. Université Bordeaux 2.
AIT-ADOUBEL (A.) - Nouvelles approches en électrophorèse capillaire pour l’énantioséparation d’acides aminés aromatiques ou aliphatiques non dérivés. - 2004. Université de Rouen.
DESCROIX (S.) - L’électrophorèse capillaire en milieu non aqueux : contribution à la compréhension des phénomènes physico-chimiques impliqués et applications. - 2002. Université Paris 6.
BENNANI...
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