Présentation
RÉSUMÉ
L'utilisation d'appareils volumétriques à piston (AVAP) nécessite leur raccordement aux étalons nationaux ou internationaux. Cet article est conçu pour qu'un utilisateur puisse mettre en oeuvre les équipements dans le but de réaliser la confirmation métrologique de ses AVAP. De cette façon, il pourra raccorder les AVAP de son parc matériel tout en maîtrisant les incertitudes du processus.
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The use of a piston-operated volumetric apparatus (POVA) requires traceability to national or international standards. This paper seeks to enable a user to implement the necessary equipment in order to achieve metrological confirmation of a POVA. In this way, the POVA will be traceable and the process uncertainties will be controlled.
Auteur(s)
INTRODUCTION
Les contraintes auxquelles les pipettes doivent faire face n’ont cessé d’augmenter ces dernières années : dosage de volumes de plus en plus petits et exigences plus sévères en matière d’ergonomie. En raison de l’augmentation du nombre moyen d’échantillons, il faut pouvoir effectuer le travail sans fatigue. L’utilisation de réactifs très coûteux, surtout dans le domaine des sciences de la vie, nécessite de réduire au minimum les volumes traités.
Les systèmes d’assurance qualité modernes demandent un contrôle gravimétrique périodique et, le cas échéant, l’ajustage des pipettes. Pour effectuer les contrôles de façon efficace et fiable, il faut des balances de haute qualité, un support logiciel et des accessoires parfaitement adaptés. Tout cela constitue, avec les pipettes et les pointes, un système indissociable, une sorte de chaîne dont la qualité dépend de celle du chaînon le plus faible.
En plus de la qualité de la pipette et de la pointe, les connaissances et l’habilité de l’opérateur sont déterminantes. L’objectif de cet article est de présenter les aspects théoriques du pipetage avec les pipettes à colonne d’air.
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KEYWORDS
micropipette | piston-operated volumetric apparatus | metrology | uncertainty | gravimetry
VERSIONS
- Version courante de déc. 2015 par Denis LOUVEL
DOI (Digital Object Identifier)
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Présentation
Incertitude de mesure1. Évaluation métrologique
La méthode de contrôle la plus utilisée est la méthode gravimétrique. Une autre méthode existe cependant, c’est la méthode colorimétrique.
-
L’étalonnage basé sur la méthode gravimétrique consiste à déterminer le volume d’eau délivré par la pipette automatique. Ce volume d’eau est notamment obtenu à partir de la connaissance de la masse mesurée et de sa masse volumique, après intégration des corrections dues à l’influence des paramètres environnementaux et de l’évaporation éventuelle.
-
L’étalonnage basé sur la méthode colorimétrique consiste à faire entrer l’élément à doser dans une réaction aboutissant à un composé coloré.
L’absorption lumineuse est déterminée pour une longueur d’onde bien définie, par l’intermédiaire d’un appareil mesurant l’intensité de la lumière transmise. Pour effectuer le dosage, il suffit de se reporter à une courbe d’étalonnage établie préalablement à partir d’une série de solutions de concentrations connues. Selon la longueur d’onde de la lumière utilisée, on parlera de colorimétrie (ou spectrophotométrie dans le domaine visible), de spectrophotométrie infrarouge (IR) ou de spectrophotométrie dans l’ultraviolet (UV).
Le calcul d’incertitude pour cette méthode n’a pas fait l’objet de publication par des organismes de normalisation (international, européen ou national).
Nous ne traiterons donc dans cet article que l’étalonnage basé sur la méthode gravimétrique.
1.1 Matériel nécessaire
Les essais doivent être réalisés dans un local exempt de courants d’air avec un environnement stable.
La répétabilité des résultats est liée à la régularité d’exécution de l’opérateur et à la maîtrise de sa gestuelle.
-
Balance
L’utilisation d’une balance pour l’étalonnage des pipettes suppose un entretien et une vérification périodique comme un raccordement aux étalons nationaux. En fonction des volumes sélectionnés, la balance doit avoir une erreur ou un écart inférieur ou égal...
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