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EnglishRÉSUMÉ
Les nouvelles générations de systèmes de biopuces, les biopuces dynamiques, permettent d’accéder à la cinétique des interactions biomoléculaires et devraient révolutionner leurs caractérisations. Ces systèmes ont des applications tant en recherche qu’en outil de routine pour l’identification de signatures moléculaires. La méthode de choix repose actuellement sur des techniques d’imagerie en mode de résonance de plasmon de surface. La simplicité de l’utilisation des biopuces, ainsi que sa fiabilité, en font un outil majeur pour l’analyse généralisée, en temps réel et à faible coût, de molécules en faible quantité.
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Lire l’articleAuteur(s)
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Pierre LECARUYER : Doctorant au laboratoire Charles Fabry de l'Institut d'optique
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Michael CANVA : Directeur de recherche - Laboratoire Charles Fabry de l'Institut d'optique - Institut d'optique Graduate School, Université Paris Sud, CNRS
INTRODUCTION
Nouvelles générations de systèmes de biopuces, les biopuces dynamiques permettent d'accéder à la cinétique des interactions biomoléculaires (figure 1) et devraient révolutionner leurs caractérisations. Ces systèmes peuvent avoir des applications tant en recherche qu'en outil de routine pour l'identification de signatures moléculaires. La méthode de choix repose actuellement sur des techniques d'imagerie en mode de résonance de plasmon de surface.
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4. Réalisation d’une biopuce
4.1 Importance de la chimie de surface
Comme on l’a indiqué en introduction, la biopuce optique nécessite le concours de plusieurs disciplines scientifiques (microélectronique, chimie, biologie, bioinformatique, optique, etc.). Un des points clefs dans la mise en œuvre des systèmes de biopuce réside dans la maitrise de la réalisation des surfaces actives des biopuces. En effet, le cahier des charges de ces surfaces est relativement contraignant : globalement, cette dernière doit être biochimiquement inerte sauf dans les zones actives formant les plots de mesures où chacune doit être réactive à une cible spécifique .
Dans le cas de biopuces à ADN, ces plots sont fonctionnalisés par des séquences d'oligonucléotides à l'état de simples brins choisis pour reconnaître dans une solution « cible » des séquences oligonucléotidiques complémentaires.
Dans le cas d'une puce pour le diagnostic génétique, cette réponse doit être capable de différencier sans ambigüité ces séquences cibles à une base près.
Pour des systèmes de biopuces à marqueurs, notamment ceux à « fluorescence », la spécificité est principalement liée à l'absence de réactivité vis-à-vis des marqueurs et des entités auxquels ils sont liés notamment dans le cas des puces à ADN, cela concerne uniquement les autres séquences d'ADN marquées. Pour des systèmes de biopuces sans marqueurs, notamment ceux à « résonance de plasmon de surface », cette spécificité des réactions biochimiques s'étend à l'ensemble des entités présentes dans le mélange « cible », ce qui dans le cas de solutions biologiques « concrètes » est bien plus contraignant.
De façon générale, un des facteurs principaux limitant la précision des mesures de biopuce est le manque de contrôle relatif des surfaces actives du point de vue de leur spécificité et réactivité, tant en homogénéité qu'en reproductibilité.
Cependant, l'avantage des systèmes...
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Réalisation d’une biopuce
BIBLIOGRAPHIE
-
(1) - SOULARUE (P.), GIDROL (X.) - Puces à ADN - [RE 6], Bioprocédés (2002).
-
(2) - GIDROL (X.), BAGHDOYAN (S.), ROUPIOZ (Y.) - Les biopuces - [RE 17], Bioprocédés (2004).
-
(3) - LECARUYER (P.), MANNELLI (I.), COURTOIS (V.), GOOSSENS (M.), CANVA (M.) - Surface plasmon resonance imaging as a multidimensional surface characterization instrument – application to biochip genotyping - Analytica Chimica Acta 573, 533-540 (2006).
-
(4) - L. MOISEEV (L.), SELIM UNLU (M.), SWAN (A.K.), GOLDBERG (B.B.), CANTOR (C.R.) - DNA conformation on surfaces measured by fluorescence self-interference - PNAS 2006, 103, n° 8, 2623-2628 (2006).
-
(5) - LECARUYER (P.), MAILLART (E.), CANVA (M.), ROLLAND (J.) - Generalization of the Rouard method to an absorbing thin film stack and application to surface plasmon resonance - Applied Optics, 45, Issue 33, 8419-8423 (2006).
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(6)...
ANNEXES
Catalogue en ligne http://www.abes.fr/abes/index.html
Thèses disponibles en ligne http://tel.archives-ouvertes.fr/
HAUT DE PAGE
Brevet FR n° 05 12 594, « Procédé d'auto-calibration de biopuces » – CNRS (13/12/2005). Étendu international PCT/EP2006/069683 – (13/12/2006).
HAUT DE PAGE3.1 Constructeurs. Fournisseurs. Distributeurs (liste non exhaustive)
ACEA Biosciences http://www.aceabio.com/Products/index.htm
Affymetrix http://www.affymetrix.com/index.affx
Akubio http://www.akubio.com/
Applied Biophysics ...
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