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En anglaisRÉSUMÉ
La radioactivité offre des possibilités de suivre des éléments en très faible concentration. La radio-immunologie reste la mesure de référence de l’infiniment petit en biologie. Cet article présente les techniques de radio-immunologie, du dosage des substances à la détection du signal radioactif. Cette méthode est en constante évolution, pour améliorer sa simplicité, sa détectabilité et sa rapidité, notamment par une automatisation croissante.
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Lire l’articleAuteur(s)
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François BOURREL : Docteur en pharmacie - Diplômé de l’Institut national des sciences et techniques nucléaires - du Commissariat à l’énergie atomique (INSTN-CEA) - Attaché des Hôpitaux de Toulouse
-
Philippe COURRIÈRE : Professeur de biophysique, UFR de pharmacie, Toulouse - Biologiste des centres de luttes contre le cancer
INTRODUCTION
Les radio-isotopes ont révolutionné la biologie médicale. La radio-immunologie reste la mesure de référence de l’infiniment petit en biologie. Des efforts constants ont été réalisés pour améliorer la simplicité, la détectabilité et la rapidité (par une automatisation croissante) de la méthode.
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2. Système d’antigène-anticorps
En 1960, R. Yalow et S. Berson proposent un dosage de l’insuline plasmatique par une méthode [21] faisant appel à une réaction antigène-anticorps associée à l’emploi d’insuline marquée à l’iode 131. Ils inventent une méthode de dosage qui devait, en quelques années, connaître de multiples débouchés : la radio-immunoanalyse.
Son développement bénéficia également de circonstances favorables, notamment : les travaux de L. Miles et C. Hales sur le marquage des anticorps [22][23], l’utilisation dans le dosage d’une molécule non plus d’un mais de deux anticorps capables de réagir sur des sites différents de la molécule. Les résultats obtenus dès 1968 par ces auteurs permirent de passer aux techniques par excès d’anticorps et d’améliorer encore la limite de détection jusqu’à des valeurs de 10–16 et 10–17 moles pour le dosage de la GH (hormone de croissance) par exemple.
2.1 Propriétés du système antigène-anticorps
Le système antigène-anticorps obéit aux mêmes principes de l’interaction ligand-récepteur et est à la base de tous les immuno-dosages. Il est caractérisé par la capacité de liaison réversible et met en jeu des liaisons non covalentes qui impliquent des interactions de types hydrophobes, forces de Van der Waals, interstatiques et hydrogènes.
Cette réaction, qui obéit à la loi d’action de masse, est réversible et on obtient un équilibre lorsque la quantité de complexe Ag-Ac formé par unité de temps est égale à la quantité de ce même complexe dissocié par unité de temps :
On peut écrire :
avec :
- [Ag] :
- concentration molaire en antigène
- [Ac] :
- concentration molaire en anticorps
- [Ag-Ac] :
- concentration du complexe...
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