Article de référence | Réf : IN178 v1

Implication de l'électrophorèse capillaire dans l'étude des réactions enzymatiques
Miniaturisation des essais enzymatiques par électrophorèse capillaire

Auteur(s) : Reine NEHMÉ

Date de publication : 10 nov. 2014

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Auteur(s)

  • Reine NEHMÉ : Maître de conférences - Institut de chimie organique et analytique (UMR, CNRS 7311), Institut universitaire de technologie (IUT), département de chimie, université d'Orléans, France

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INTRODUCTION

Points clés

Domaine : Techniques d'analyse

Degré de diffusion de la technologie : Émergence | Croissance | Maturité

Technologies impliquées : Électrophorèse capillaire

Domaines d'application : Biologie cellulaire et moléculaire, chimie thérapeutique, cosmétique

Principaux acteurs français :

Pôles de compétitivité : –

Centres de compétence : –

Industriels : –

Autres acteurs dans le monde : un certain nombre de laboratoires académiques ou centres de recherche dont les travaux sont mentionnés en bibliographie. En ce qui concerne les acteurs industriels, on peut citer Caliper Life Sciences (PerkinElmer, Hopkinton – Massachusetts, États-Unis)

Contact : –

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DOI (Digital Object Identifier)

https://doi.org/10.51257/a-v1-in178


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3. Implication de l'électrophorèse capillaire dans l'étude des réactions enzymatiques

L'EC a été utilisée la première fois en 1991 par Banke et[nbsp ]coll.  pour le suivi de l'activité de la protéase alcaline. Depuis lors, l'EC s'est développée pour la détermination de la cinétique enzymatique et l'identification de substrats, d'activateurs et d'inhibiteurs de nombreuses enzymes. Les différentes approches trouvées dans la littérature pour l'étude des réactions enzymatiques en EC sont indiquées dans la figure 1. On peut distinguer deux stratégies selon que l'incubation est[nbsp ]faite à l'extérieur ou à l'intérieur du capillaire (off- capillary ou in-capillary enzymatic assays  ).

3.1 Essais enzymatiques à l'extérieur du capillaire (off-capillary enzymatic assays  )

Dans cette approche, la réaction enzymatique a lieu dans un flacon à l'extérieur du capillaire. Ce groupe comprend les modes précapillaire et postcapillaire.

  • Le mode précapillaire (pre-capillary assays ) a été le mode le plus utilisé en EC pour réaliser des essais enzymatiques  et appliqué à des enzymes appartenant...

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BIBLIOGRAPHIE

  • (1) - NEHME (H.), NEHME (R.), LAFITE (P.) et al -   In-capillary reactant mixing for monitoring glycerol kinase kinetics by CE.  -  J. Sep. Sci., 36(13), p. 2151-2157 (2013).

  • (2) - NØRBY (J.G.), ESMANN (M.) -   The effect of ionic strength and specific anions on substrate binding and hydrolytic activities of Na, K-ATPase.  -  J. Gen. Physiol., 109(5), p. 555-570 (1997).

  • (3) - KANIE (Y.), KANIE (O.) -   Electrophoretically mediated reaction of glycosidases at a nanoliter scale.  -  Electrophoresis, 24, p. 1111-1118 (2003).

  • (4) - TENU (J.-P.), VIRATELLE (O.M.), GARNIER (J.) et al -   pH dependence of the activity of β-galactosidase from escherichia coli.  -  Eur. J. Biochem., 20(3), p. 363-370 (1971).

  • (5) - PALMIERI (S.), LEONI (O.), IORI (R.) -   A steady-state kineties study of myrosinase with direct ultraviolet spectrophotometric assay.  -  Anal. Biochem., 123(2), p. 320-324 (1982).

  • (6)...

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1.1 Constructeurs – Fournisseurs – Distributeurs (Liste non exhaustive)

Agilent Technologies (appareillage conventionnel) http://www.chem.agilent.com

Beckman Coulter (appareillage conventionnel) http://www.beckmancoulter.com

Caliper Life Sciences (PerkinElmer) http://www.caliperLS.com

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