1 - PRINCIPE GÉNÉRAL ET PHÉNOMÈNES DE TRANSPORT

• 1.1 - Principe
  Figure 1 - Schéma de principe d’un système d’électrophorèse capillaire
• 1.2 - Migration électrophorétique
  Figure 2 - Effet du pH sur les concentrations relatives et sur la valeur absolue de la mobilité électrophorétique de l’acide faible AH Tableau 1 - Mobilités électrophorétiques absolues à 25 °C de certains ions
• 1.3 - Migration électroosmotique
  Figure 3 - Effet du pH sur la mobilité électroosmotique selon la nature du matériau du capillaire, rempli avec un électrolyte de force ionique constante (60 mM) [3]
• 1.4 - Bilan des phénomènes de transport

  • Quiz d'entraînement
  Figure 4 - Schéma des vitesses électrophorétiques, électroosmotiques et apparentes pour les cations (C2+, C’+ et C’’+), un composé neutre N et les anions A’’–, A’– et A2–, avec un écoulement électroosmotique cathodique

2 - GRANDEURS FONDAMENTALES

• 2.1 - Temps de migration
  Figure 5 - Électrophorégramme de l’analyse de deux cations (1 et 2), de molécules neutres (N) et de deux anions (3 et 4) dans le cas d’un écoulement électroosmotique cathodique
• 2.2 - Calcul des mobilités apparentes, électrophorétiques et électroosmotiques
  Tableau 2 - Exemple de calculs des mobilités apparentes et électrophorétiques à [...]
• 2.3 - Efficacité et résolution

  • Quiz d'entraînement

3 - CONTRIBUTIONS À L’ÉLARGISSEMENT DES PICS

• 3.1 - Diffusion
• 3.2 - Effet Joule
  Figure 6 - Tracé de la loi d’Ohm pour contrôler l’effet Joule et déterminer la tension maximale utilisable pour un électrolyte et un capillaire de diamètre interne et de longueur donnés
• 3.3 - Adsorption
• 3.4 - Électrodispersion
  Figure 7 - Effets de l’électrodispersion
• 3.5 - Injection
• 3.6 - Autres sources de dispersion

  • Quiz d'entraînement

4 - PRINCIPE DES DIFFÉRENTS MODES DE SÉPARATION EN ÉLECTROPHORÈSE CAPILLAIRE

• 4.1 - Électrophorèse capillaire de zone
  Figure 8 - Séparation en CZE de cations alcalins, alcalino-terreux et de lanthanides [9] Figure 9 - Analyse des glycanes, obtenus après digestion par la PNGase F d’un anticorps monoclonal thérapeutique et dérivation avec l’APTS, par CZE couplée à une détection en ligne LIF ou LIF-MS (signal LIF, signal MS) [10] Figure 10 - Analyse en CZE-MS d’érythropoïétine (NeoRecormon, Roche, 0,2 mg/mL) [11]
• 4.2 - Chromatographie électrocinétique
  Figure 11 - Représentation schématique des phénomènes de migration en chromatographie électrocinétique micellaire (MEKC) avec des micelles anioniques, un analyte neutre et un écoulement électroosmotique cathodique dont la mobilité est supérieure à la mobilité électrophorétique des micelles en valeur absolue Figure 12 - Séparation et énantioséparation de la thalidomide et de ses métabolites neutres de phase-1 par EKC avec des cyclodextrines [12]
• 4.3 - Électrochromatographie
  Figure 13 - Séparation en CEC de phénylurées et d’hydrocarbures aromatiques polycycliques sur un monolithe à base d’acrylate de butyle synthétisé in situ observé en microscopie électronique à balayage [13]
• 4.4 - Électrophorèse capillaire en gel
  Figure 14 - Séparation en CGE de fragments d’ADN dans un gel de polyacrylamide (T = 4 g/cm3 et C = 5 %) [14] Figure 15 - Séparation en SDS-CGE d’un anticorps monoclonal avant et après dégradation, réduit ou non-réduit [15]
• 4.5 - Isoélectrofocalisation capillaire

  • Quiz d'entraînement
  Figure 16 - Schéma de principe de l’isoélectrofocalisation capillaire (CIEF) représentant le sens et l’amplitude de la vitesse d’un composé amphotère lors de sa focalisation au point de pH égal à son pI Figure 17 - Analyse en CIEF de trois anticorps monoclonaux thérapeutiques commerciaux [16]

5 - CONCLUSION

6 - GLOSSAIRE

TEST DE VALIDATION