Article de référence | Réf : IN178 v1

Conclusion
Miniaturisation des essais enzymatiques par électrophorèse capillaire

Auteur(s) : Reine NEHMÉ

Date de publication : 10 nov. 2014

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Auteur(s)

  • Reine NEHMÉ : Maître de conférences - Institut de chimie organique et analytique (UMR, CNRS 7311), Institut universitaire de technologie (IUT), département de chimie, université d'Orléans, France

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INTRODUCTION

Points clés

Domaine : Techniques d'analyse

Degré de diffusion de la technologie : Émergence | Croissance | Maturité

Technologies impliquées : Électrophorèse capillaire

Domaines d'application : Biologie cellulaire et moléculaire, chimie thérapeutique, cosmétique

Principaux acteurs français :

Pôles de compétitivité : –

Centres de compétence : –

Industriels : –

Autres acteurs dans le monde : un certain nombre de laboratoires académiques ou centres de recherche dont les travaux sont mentionnés en bibliographie. En ce qui concerne les acteurs industriels, on peut citer Caliper Life Sciences (PerkinElmer, Hopkinton – Massachusetts, États-Unis)

Contact : –

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DOI (Digital Object Identifier)

https://doi.org/10.51257/a-v1-in178


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4. Conclusion

L'électrophorèse capillaire est une technique de choix pour étudier la cinétique (activité, inhibition) de plusieurs types de réactions enzymatiques intéressantes dans les domaines cosmétique, agroalimentaire et thérapeutique. Plusieurs approches peuvent être envisagées, ce qui prouve la flexibilité des tests enzymatiques basés sur l'EC. À ce titre, il faut prendre en compte le nombre de réactifs mis en jeu, leur disponibilité, leur prix et leur taille pour pouvoir choisir le type d'essai approprié. Les méthodes développées sont économes en réactifs, rapides et s'appliquent parfaitement à des échantillons complexes (contenu cellulaire, extraits de plantes, etc.). Des études quantitatives fiables peuvent être réalisées afin de déterminer les constantes cinétiques (V max  , K m et IC 50) d'une réaction enzymatique. L'EC est particulièrement intéressante pour le criblage à haut débit d'effecteurs de l'activité enzymatique surtout si des appareils munis de cassettes multicapillaires sont utilisés. En outre, la réalisation de ces essais sur des micropuces est envisageable pour une miniaturisation plus poussée.

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BIBLIOGRAPHIE

  • (1) - NEHME (H.), NEHME (R.), LAFITE (P.) et al -   In-capillary reactant mixing for monitoring glycerol kinase kinetics by CE.  -  J. Sep. Sci., 36(13), p. 2151-2157 (2013).

  • (2) - NØRBY (J.G.), ESMANN (M.) -   The effect of ionic strength and specific anions on substrate binding and hydrolytic activities of Na, K-ATPase.  -  J. Gen. Physiol., 109(5), p. 555-570 (1997).

  • (3) - KANIE (Y.), KANIE (O.) -   Electrophoretically mediated reaction of glycosidases at a nanoliter scale.  -  Electrophoresis, 24, p. 1111-1118 (2003).

  • (4) - TENU (J.-P.), VIRATELLE (O.M.), GARNIER (J.) et al -   pH dependence of the activity of β-galactosidase from escherichia coli.  -  Eur. J. Biochem., 20(3), p. 363-370 (1971).

  • (5) - PALMIERI (S.), LEONI (O.), IORI (R.) -   A steady-state kineties study of myrosinase with direct ultraviolet spectrophotometric assay.  -  Anal. Biochem., 123(2), p. 320-324 (1982).

  • (6)...

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1.1 Constructeurs – Fournisseurs – Distributeurs (Liste non exhaustive)

Agilent Technologies (appareillage conventionnel) http://www.chem.agilent.com

Beckman Coulter (appareillage conventionnel) http://www.beckmancoulter.com

Caliper Life Sciences (PerkinElmer) http://www.caliperLS.com

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